Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения...


Определение Т3

Принцип способа: «T3 – ИФА» является одностадийным, конкурентноспособным, твердофазным иммуноферментным способом. Тест разработан на базе высокоспецифических очищенных моноклональных антител к Т3. Применяемые эталоны, калибровочные пробы и контрольную сыворотку инкубируют в одну стадию с Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... шариками, полигаптеном (конъюгат Т3 с белком) и конъюгатом моноклональных анти - Т3 антител с пероксидазой хрена.

Во время инкубации анти – Т3 антитела связываются или с Т3 на шариках, или с Т3 из эталона Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... калибровочной пробы либо контрольной сыворотки.

После промывки шарики инкубируют с рабочим веществом субстрата (тот же состав, что и при определении ТТГ).

Развивающаяся голубая расцветка находится в прямой зависимости от количества связанного анти Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... - Т3 конъюганта пероксидазы [75].

Интенсивность расцветки, образующейся в итоге ферментативной реакции, оценивается при 450 нм и находится в оборотной зависимости от концентрации Т3 в образчике.


Определение Т4

Принцип способа: «Т4 - ИФА» является Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... одностадийным, конкурентноспособным, твердофазным иммуноферментным способом, при помощи которого определяют как связанную, так и свободную формы тироксина. Исследуемые эталоны, калибровочные пробы и контрольную сыворотку инкубируют в одну стадию с шариками, покрытыми ковалентно связанными с белком Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения...-носителем Т4 и конъюгантом моноклональных мышиных анти -Т4 антител с пероксидазой хрена. Во время инкубации вещества, находящиеся в диссоциирующем буфере, освобождают связанный Т4, который соперничает с иммобилизированным на шарике определенным количеством Т Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения...4 за связывание с ограниченным количеством анти - Т4 антител конъюганта. После промывки шарики инкубируют с рабочим веществом субстрата. Развивающаяся расцветка находится в прямой зависимости от количества связанного анти - Т4 конъюганта пероксидазы. Интенсивность расцветки Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... оценивается при 450 нм и находится в оборотной зависимости от концентрации Т4 в образчике [76].

Так как определяемые прибором концентрации лежат в интервале от 0 до 300 нг, а в образчиках концентрация еще больше, анализ Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... проводили при 10 кратном разбавлении эталона с следующим пересчетом.


^ Расцветка нейросекреторных клеток альдегид-фуксином по Гомори в модификации а.л. поленова

Расцветка - хромовым гемотоксилином. Фиксация - жидкость Буэна. Заливка - парафин, парафин-целлоидин.

1. Срезы окислить в течение Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... 1мин. Консистенцией 1:1 0,3% H2SO4 (срезы получают оранжевую расцветку).

2. Обесцветить в 2% растворе NaHSO4 либо Na2S2 O5 . Заблаговременно приготовить краситель. Для этого соединяют 1:1 водяной раствор гематоксилина (1% для полного растворения подогреть) и 3% раствор хромовых Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... квасцов. К каждому 100 куб. этой консистенции добавляют 2куб. 5% K2 Cr2O4 и 2куб. 0.5N раствора H2SO4 либо 2.5% раствор H2O4.

Смесь созревает 48ч. Можно использовать, пока нет железного блеска.

После гипосульфата Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... помыть срезы в 2-х порциях дистиллированной воды и красить 10-15 мин.

В случае перекраски дифференцировать в 1% растворе соленокислого спирта.

3. Помыть в проточной воде до посинения (1.5-3ч).

4. Ополоснуть в дистиллированной воде.

5. Провести через две порции Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... 96% спирта.

6. Карбол-ксилол - 5мин. Бальзам.


Способ расцветки нуклеиновых кислот по Эйнарсону

Для фотометрического определения содержания нуклеиновых кислот употреблялся способ расцветки нуклеиновых кислот по Эйнарсону (внедрение в качестве красителя раствора ГХК - галлоцианинхромовых Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... квасцов).

Соленокислый галлоцианин при кипячении с хромовыми квасцами образует хромовый комплекс галлоцианина в виде 3-х комплексов: лак-катион, лак-гидроксид, лак-сульфат. Взаимодействуя с нуклеиновыми кислотами лак-катион образует солевые связи с Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... остатками НРО. Таковой комплекс окрашивается в синий цвет. Среднее значение рН для окрашивания нуклеиновых кислот 0,83-1,73, для цитоспектрофотометрических исследовательских работ – 1,64.

Расцветку срезов проводят по последующей схеме:

Депарафинированные срезы довести до дистиллированной воды.

Окрашивать Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... в растворе ГХК в течении 48 часов при комнатной
температуре.

Помыть в проточной и ополоснуть в дистиллированной воде.

Обезводить в растворе спиртов восходящей концентрации.

Помыть в ксилоле.

Заключить в бальзам.

Для сравнительного определения содержания ДНК часть Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... препаратов подвергалась кислотному гидролизу с целью удаления нуклеиновых кислот


Вариационно-статистические способы


Способами вариационной статистики определяются последующие характеристики:

1. среднеарифметическая вариантов (Ма);

2. среднеквадратическое отклонение (S);

3. ошибка среднеарифметической (ш);

4. надежность средней величины (tma);

5. достоверность Определение Т3 - Отчет о выполнении 2 этапа Государственного контракта № П710 от 12 августа 2009 г и Дополнения... результатов (Р). При вычислении использовались формулы:


(7)



где V — значение каждого члена ряда

Z — частота встречаемости членов ряда п - общее число вариантов.


(8)


(9)


(10)


(11)


opredelenie-sposoba-pechati-referat.html
opredelenie-srednego-absolyutnogo-prirosta-srednih-tempov-rosta-i-srednego-prirosta.html
opredelenie-srednej-mnogoletnej-velichini-normi-godovogo-stoka-pri-nalichii-dannih-nablyudenij.html